Desarrollo de un biosensor con base en celulosa funcionalizada con biotina

Abstract

En este trabajo se evaluó la modificación superficial de celulosa con grupos amino primarios para anclar biotina y capturar estreptavidina con el fin de demostrar la capacidad de la celulosa como sustrato para desarrollar un biosensor óptico. La modificación superficial se realizó con (3-aminopropil)trietoxisilano (APTES) o con quitosano en cuadros de celulosa de 1 cm2. La caracterización del material modificado se llevó a cabo mediante FTIR y XPS y se confirmó la presencia de grupos amino en la superficie. La caracterización por TGA mostró la presencia de residuos atribuibles al silicio para los papeles modificados con APTES. La inmovilización de la biotina en la celulosa modificada se realizó en solución buffer a pH 7.4. El análisis por FTIR mostró la presencia de grupos amida y el XPS la presencia de azufre ambos provenientes de la biotina. El biosensor (complejo celulosa-biotina) se probó con estreptavidina marcada con el fluoróforo cy3 (cianina). La interacción de la biotina con la estreptavidina se midió por fluorescencia y se observó emisión a 555 nm. Por último, de modo cualitativo se utilizó un microscopio con lector multimodo dónde se visualizó la presencia de puntos fluorescentes correspondientes a la estreptavidina del material funcionalizado con biotina a diferencia del testigo negativo (celulosa sin biotina). Los resultados arrojados en este trabajo indican que la celulosa modificada con APTES es más sensible a la presencia de estreptavidina que la celulosa modificada con quitosano, indicando que esta puede ser una metodología ideal para inmovilizar biomoléculas de interés.