Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: https://hdl.handle.net/20.500.12104/84931
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dc.contributor.authorCamacho Palafox, José Alberto
dc.date.accessioned2021-10-05T19:58:34Z-
dc.date.available2021-10-05T19:58:34Z-
dc.date.issued08/12/2017
dc.identifier.urihttps://wdg.biblio.udg.mx
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/20.500.12104/84931-
dc.description.abstractEl estado de Jalisco es el principal productor de leche en México y la producción proviene principalmente de razas lecheras especializadas como es la raza Holstein. Uno de los problemas que enfrentan los diferentes sistemas de producción es la mastitis bovina que ocasiona una disminución en la producción y en la calidad de la leche. Uno de los principales agentes causantes de esta enfermedad es Staphylococcus aureus, ésta especie es un patógeno contagioso que se propaga fácilmente en la ganadería, cuenta con una gran cantidad de genes que le confieren sus características patogénicas. En la actualidad los estudios de tipificación genética que se basan en la variabilidad genética de la especie bacteriana proporcionando datos importantes para el control de su diseminación. El objetivo del presente trabajo fue determinar la variación genética de Staphylococcus aureus de vacas lecheras del estado de Jalisco. Se utilizaron 335 vacas pertenecientes a 27 establos de los 10 municipios que reportan mayor producción de leche en el estado de Jalisco. Para determinar la frecuencia de mastitis subclínica se realizó la prueba de California (CMT), mientras que para identificar las cepas de S. aureus, se colectaron muestras de leche de cada glándula mamaria de cada vaca, las cuales fueron cultivadas en agar sangre. La identificación de cepas S. aureus se realizó a partir de las características en el cultivo, y las pruebas bioquímicas, y finalmente su comprobación molecular mediante PCR. Para la determinación de la variación genética se utilizaron las cepas identificadas las que fueron utilizadas por la técnica de electroforesis de campos pulsados (PFGE), las imágenes de los geles obtenidos fueron analizadas mediante el software Bionumerics®. Se determinó una frecuencia del 42.71% de mastitis, de la cual la mastitis clínica representó el 2.26% y de la mastitis subclínica un 40.45%. Se registró una frecuencia de aparición de S. aureus del 9.8% del total de las glándulas muestreadas. Se obtuvo la variación genética de 14.9%. Las 32 cepas analizadas se agruparon en pulsotipos con 95% o más de similitud genética, resultando 12 pulsotipos. Los resultados obtenidos con las cepas aisladas, nos demuestra la gran diversidad en la variación genética de cepas de S. aureus de diferentes establos del estado de Jalisco, y la gran similitud genética de cepas pertenecientes al mismo establo.
dc.description.tableofcontentsÍNDICE GENERAL AUTORIZACIONES................................................................................................. i RECONOCIMIENTOS............................................................................................ iv ÍNDICE GENERAL ................................................................................................. v LISTA DE CUADROS...........................................................................................viii LISTA DE FIGURAS.............................................................................................. ix ABREVIATURAS.................................................................................................... x RESUMEN ............................................................................................................. xi ABSTRACT .......................................................................................................... xii I. INTRODUCCIÓN. ................................................................................................ 1 II. HIPÓTESIS. ........................................................................................................ 4 III. OBJETIVOS....................................................................................................... 5 3.1. Objetivo general....................................................................................... 5 3.2. Objetivos específicos............................................................................... 5 IV. JUSTIFICACIÓN................................................................................................ 6 V. REVISIÓN DE LITERATURA. ............................................................................ 7 5.1. Producción lechera en el estado en Jalisco............................................. 7 5.1.1. Sistemas de producción en el estado........................................... 8 5.1.1.1. Explotaciones lechería familiar....................................... 8 5.1.1.2. Explotaciones semitecnificadas. ....................................... 8 5.1.1.3. Explotaciones tecnificadas................................................ 9 5.2. Anatomía y fisiología de la lactancia........................................................ 9 5.3. Mastitis. ................................................................................................. 10 5.3.1. Definición.................................................................................... 10 5.3.2. Tipos de mastitis......................................................................... 10 5.3.2.1. Mastitis subclínica........................................................... 10 5.3.2.2. Mastitis clínica..................................................................11 5.3.3. Fisiopatología de la mastitis. ...................................................... 13 5.2.3. Métodos de detección de mastitis bovina................................... 14 5.2.3.1. Prueba de California (CMT). ........................................... 15 5.2.4. Impacto en la industria lechera................................................... 15 5.2.4.1. Disminución en la producción de leche........................... 16 5.2.4.2. Alteraciones en la calidad de la leche. ............................ 16 5.2.5. Agentes causantes de mastitis................................................... 16 5.2.6. Resistencia antimicrobiana......................................................... 17 5.3. Género Staphylococcus......................................................................... 18 5.3.1. Staphylococcus aureus. ............................................................. 18 vi 5.3.1.2. Características genéticas................................................ 19 5.3.1.3. Factores de virulencia..................................................... 20 5.3.1.4. Genes asociados a factores de virulencia. ..................... 21 5.4. Variación genética. ................................................................................ 23 5.5. Tipificación molecular de microorganismos. .......................................... 24 5.5.1. Técnicas utilizadas. .................................................................... 24 5.5.1.1 Técnica de PFGE............................................................. 25 Vl. MATERIALES Y MÉTODOS. .......................................................................... 26 6.1. Muestreo................................................................................................ 26 6.1.1. Lugar. ......................................................................................... 26 6.1.2. Cálculo del tamaño de muestra.................................................. 27 6.2. Metodología de muestreo. ..................................................................... 27 6.3. Detección de mastitis............................................................................. 28 6.4. Obtención de muestras.......................................................................... 30 6.5. Cultivo bacteriológico............................................................................. 30 6.6. Identificación del género........................................................................ 31 6.7. Identificación presuntiva de S. aureus................................................... 31 6.7.1. Prueba de coagulasa (en tubo). ................................................. 31 6.7.2. Prueba de fermentación de manitol............................................ 32 .7.3. Prueba de DNAsa. ....................................................................... 33 6.8. Confirmación de especie. ...................................................................... 33 6.8.1. Técnica de PCR. ........................................................................ 34 6.8.1.1. Extracción del ADN......................................................... 34 6.8.1.2. Cebadores. ..................................................................... 35 6.8.1.3. Mezcla de reacción......................................................... 36 6.8.1.4. Programa de PCR........................................................... 36 6.8.1.5. Electroforesis. ................................................................. 37 6.9. Determinación de la variación morfológica. ........................................... 38 6.10. Determinación de la variación genética. .............................................. 38 6.9.1. Elaboración de la técnica de electroforesis de campos pulsados (PFGE)................................................................................................. 38 6.9.1.1. Pasos de la PFGE. ......................................................... 39 6.10. Análisis estadístico. ............................................................................. 39 6.11. Logística y recurso del proyecto. ......................................................... 39 6.11.1. Programación de actividades. .................................................. 39 6.11.2. Fuentes de recursos para el desarrollo del proyecto................ 40 VII. RESULTADOS................................................................................................ 41 7.1. Frecuencia de mastitis........................................................................... 41 7.1.1. Frecuencia de mastitis clínica. ................................................... 42 7.1.2. Frecuencia de mastitis subclínica............................................... 42 7.2. Frecuencia de agentes etiológicos. ....................................................... 43 7.3. Variación morfológica de 32 cepas de S. aureus del estado de Jalisco. 46 7.4. Variación genética de S. aureus mediante la técnica de PFGE............. 47 vii 7.4.1. Perfiles genéticos de S. aureus.................................................. 47 7.4.2. Dendrogramas de variación genética de S. aureus.................... 48 7.5. Relación de las características morfológicas con variación genética. ... 50 VIII. DISCUSIÓN................................................................................................... 51 IX. CONCLUSIONES............................................................................................ 55 GLOSARIO........................................................................................................... 56 LITERATURA CITADA ......................................................................................... 60 ANEXOS............................................................................................................... 69 Anexo A. Técnica de toma de muestra de leche........................................... 70 Anexo B. Técnica de electroforesis de campos pulsados............................. 72
dc.formatapplication/PDF
dc.language.isospa
dc.publisherBiblioteca Digital wdg.biblio
dc.publisherUniversidad de Guadalajara
dc.rights.urihttps://www.riudg.udg.mx/info/politicas.jsp
dc.subjectProduccion Pecuaria
dc.titleDETERMINACIÓN DE LA VARIACIÓN GENÉTICA DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS EN VACAS LECHERAS DEL ESTADO DE JALISCO
dc.typeTesis de Maestría
dc.rights.holderUniversidad de Guadalajara
dc.rights.holderCamacho Palafox, José Alberto
dc.coverageZAPOPAN, JALISCO
dc.type.conacytmasterThesis
dc.degree.nameMAESTRIA INTERINSTITUCIONAL EN PRODUCCION PECUARIA
dc.degree.departmentCUCBA
dc.degree.grantorUniversidad de Guadalajara
dc.degree.creatorMAESTRO EN INTERINSTITUCIONAL EN PRODUCCION PECUARIA
dc.contributor.directorPadilla Ramírez, Francisco Javier
dc.contributor.codirectorCastañeda Vázquez, Hugo
Aparece en las colecciones:CUCBA

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