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dc.contributor.advisorRamirez Anguiano, Ana Cristina
dc.contributor.advisorVelasco Ramírez, Sandra Fabiola
dc.contributor.advisorCid Hernández, Margarita
dc.contributor.authorCuriel Olague, Brenda Gisella
dc.date.accessioned2020-04-05T22:59:56Z-
dc.date.available2020-04-05T22:59:56Z-
dc.date.issued2017
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/20.500.12104/80603-
dc.identifier.urihttp://wdg.biblio.udg.mx
dc.description.abstractRESUMEN Aislamiento y caracterización de un pigmento proveniente de Arthrospira platensis y su evaluación como agente fotosensibilizante en Staphylococcus aureus Brenda Gisella Curiel Olague Director: Dra. Ana Cristina Ramírez Anguiano Ca-director: Dra. Sandra Fabiola Velasco Ramírez Asesor: M. en C. Margarita Cid Hernández La terapia fotodinámica o PDT (por su sigla en inglés Photodynamic Therapy) es una tecnología médica que usa láseres, u otras fuentes de luz visible, para activar moléculas susceptibles a este tipo de luz y de esta manera tratar diferentes enfermedades por un medio no quirúrgico y de mínima invasividad. Clínicamente este proceso consiste en administrar a los pacientes un agente fotosensibilizador AFS, o inductor de este por vía sistémica (oral o intravenosa) o tópica, y esperar el tiempo en que se acumule selectivamente en el tejido "diana" para posteriormente irradiar, con luz de longitud de onda, en la que se absorbe el agente fotosensibilizador, con la finalidad de activarlo. Los productos del proceso de activación del agente son especies reactivas de oxígeno y radicales libres citotóxicos que destruyen las células malignas o alteradas.
dc.description.tableofcontentsÍNDICE Página RESUMEN .................................................................................................. . DEDICATORIA............................................................................................ 111 AGRADECIMIENTOS.................................................................................. 1v ABREVIATURAS......................................................................................... v ÍNDICE......................................................................................................... VI LISTA DE FIGURAS···················································································· XI LISTA DE TABLAS····················································································· XV 1. INTRODUCCIÓN ... ················································································· 1 2. ANTECEDENTES................................................................................... 4 2.1 Fototerapia, fotoquímica y TFD . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 2.2 Aspectos químicos de la fototerapia, fotoquimioterapia y TFD. 5 2.2.1 Primera Ley de la fotoquímica o ley Grothuss ................. 5 2.2.2 Segunda ley de la fotodinámica o ley de Stark-Einstein .. 5 2.2.3 Tipos de reacciones fotoquímicas .................................. 5 2.3 Orígenes de la TFD . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 2.4 Fundamentos físicos, biofísicos y tecnológicos de la TFD . . . . . . . . . . . . . 9 2.4.1 Fotoquímica de la TFD ..................................................... 9 2.4.2 Mecanismo Tipo 1 . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • . • 9 2.4.3 Mecanismo Tipo 11 ........................................................... 1 O vi 2.4.4 Especies reactivas de oxígeno ........................................ 11 2.4.5 Oxigeno singulete ... ........................................................ 11 2.4.6 Radicales libres peróxidos y su peróxidos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12 2.4. 7 Oxígeno molecular........................................................... 12 2.5 Procesos radiactivos y fototérmicos generados durante la TFD . . . . 12 2.5.1 Procesos No radiactivos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12 2.5.2 Procesos Radiactivos....................................................... 13 2.5.3 Efectos fototérmicos ........................................................ 14 2.6 Componentes básicos de la TFD: fotosensibilizadores, fuentes de luz y oxigeno .................................................................................................. 14 2.6.1 Sustancias sensible a la luz (agentes fotosensibilizadores, AFS) .................................................................................................. 14 2.6.2 Fotosensibilizadores . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17 2.6.3 Luz visible en la aplicación de TFD ................................. 18 2.6.4 Oxigeno molecular (02) como componente de la TFD ... 19 2.7 Mecanismos celulares y moleculares de la TFD.... ................................ 20 2.7.1 Muerte directa de las células ... ........................................ 20 2.7.1.1 Dañovascular ...................................................................... 21 2.7.1.2Respuestalnmune ............................................................... 21 2.7.2 Mecanismos de muerte celular activados por la TFD ..... 22 2.7.3 Muerte apoptótica en la TFD ........................................... 22 2.7.4 Daño celular .................................................................... 23 2.7.4.1 Daño mitocondrial .. .............................................................. 23 2.7.4.2 Daño a membrana................................................................. 23 2.7.4.3 Daño lisosomal ..................................................................... 23 2.8 Aplicaciones de la TFD en la salud ....................................................... 24 2.9 Posibles aplicaciones de la TFD ........................................................... 25 2.9.1 Candiasis oral ... .............................................................. 26 2.9.2 Enfermedades periodontales 26 vii 2.1 O Bacterias Gram-positivas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27 2.10.1 Staphylococcus aureus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28 2.11 Infecciones Staphylococcus aureus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29 2.11.1 Impétigo ......................................................................... 29 2.11.2 Foliculitis, forúnculos y carbunco ................................... 30 2.11.3 Celulitis .......................................................................... 31 2.12 Agentes fotosensibilizantes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32 2.12.1 Naturales . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34 2.12.1 Porfirinas, derivados y precursores . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34 2.12.2 Clorofilas y derivados . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36 2.13 Características de los AFS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37 2.14 Selectividad de los AFS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37 2.15 Arthrospira platensis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40 3. JUSTIFICACIÓN···················································································· 45 4. HIPÓTESIS............................................................................................. 46 5. OBJETIVOS........................................................................................... 46 5.1 Objetivo general................................................................................ 46 5.2 Objetivos específicos........................................................................ 46 6. METODOLOGÍA..................................................................................... 47 6.1 Cosecha . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47 6.1.1 Cepa de la cianobacteria.................................................. 47 6.1.2 Sustrato (medio de cultivo)............................................... 47 6.1.3 Cultivo de Arthrospira platensis ....................................... 47 6.1.4 Obtención de la biomasa ................................................. 47 6.1.5 Preparación de la muestra................................................ 48 viii 6.2 Preparación del extracto de Arthrospira platensis..... ...................... 48 6.3 Empleo de la cromatografía de capa fina (CF): analítica para observar la presencia de pigmentos............................................................................... 49 6.4 Empleo de la cromatografía en columna para la separación de pigmentos ........................................................................................... 50 6.5 Técnicas analíticas ..................................................................... 51 6.5.1 Caracterización química por espectroscopia ................... 51 6.5.2 Caracterización química por infrarrojo ............................ 51 6.5.3 Caracterización química por espectrometría de masas.... 52 6.6 Evaluación del efecto inhibitorio de la clorofila A en la cepa Staphylococcus aureus .................................................................................................. 52 6.6.1 Medio de cultivo Mueller Hinton ...................................... 52 6.6.2 Inoculación de la cepa Staphylococcus aureus . . . . . . . . . . . . . . . 53 6.6.3 Escala McFarland ... ........................................................ 53 6.6.4 Efecto inhibitorio de la clorofila A . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55 7. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ................................................................ 57 7.1 Extracción y aislamiento del pigmento de Arthrospira platensis.... 57 7.2 Estandarización del aislamiento del pigmento proveniente de Arthrospira platensis por cromatografía por capa fina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 58 7.3 Estandarización del aislamiento del pigmento proveniente de Arthrospira platensis por cromatografía en columna..... .. .... .. .... .. .... .. .... .. .... .. .... .. .. .. 60 7.4 Caracterización química de clorofila A ....................................... 62 7.4.1 Espectroscopía UV-VIS ........................................................... 63 7.4.2 Espectroscopía de infrarrojo con transformada de Fourier (FT-IR) 64 ix 7.4.3 Espectrometría de masas ... ..................................................... 67 7.4.4 lnactivación fotodinámica de Staphylococcus aureus... .. . ... .. . . 69 8. CONCLUSIONES................................................................................... 76 9. BIBLIOGRAFÍA ............................................................................ 77 10. ANEXOS................................................................................... 92
dc.formatapplication/PDF
dc.language.isospa
dc.publisherBiblioteca Digital wdg.biblio
dc.publisherUniversidad de Guadalajara
dc.rights.urihttps://wdg.biblio.udg.mx/politicasdepublicacion.php
dc.titleAislamiento y caracterización de un pigmento proveniente de Arthrospira platensis y su evaluación como agente fotosensibilizante en Staphylococcus aureus
dc.typeTesis de Maestria
dc.rights.holderUniversidad de Guadalajara
dc.rights.holderCuriel Olague, Brenda Gisella
dc.coverageGuadalajara, Jalisco
dc.type.conacytmasterThesis-
dc.degree.nameMAESTRIA EN CIENCIAS EN QUÍMICA-
dc.degree.departmentCUCEI-
dc.degree.grantorUniversidad de Guadalajara-
dc.degree.creatorMAESTRA EN CIENCIAS EN QUÍMICA-
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