Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: https://hdl.handle.net/20.500.12104/80595
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dc.contributor.advisorSnell Castro, Raúl
dc.contributor.advisorMacías Rodríguez, María Esther
dc.contributor.advisorGutiérrez González, Porfirio
dc.contributor.authorPintado González, Maricarmen
dc.date.accessioned2020-04-05T22:59:55Z-
dc.date.available2020-04-05T22:59:55Z-
dc.date.issued2017
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/20.500.12104/80595-
dc.identifier.urihttp://wdg.biblio.udg.mx
dc.description.abstractRESUMEN La comunidad microbiana presente en los bioprocesos de digestión anaerobia para el tratamiento de bagazo de agave es la responsable de la producción de biogás, concentración de metano y remoción de materia orgánica. En este estudio se analizaron las comunidades microbianas presentes y activas en dos reactores alimentados con hidrolizados de bagazo de agave obtenidos mediante pretratamientos ácido (HA) y enzimático (HE). Este análisis consideró la presencia y actividad de los grupos de bacterias y arqueas totales a través de las técnicas de biología molecular de PCR cuantitativa (qPCR) y secuenciación masiva. Es importante mencionar, que se utilizó el mismo inóculo en ambos biorreactores, por lo cual las diferencias observadas en las comunidades microbianas se atribuyeron al tipo de hidrolizado utilizado en cada uno de los bioprocesos. Los resultados sobre la actividad (ARN) de la comunidad indicaron que el bioproceso HA alcanzó una producción de 16.6 L/día de biogás y un rendimiento de 0.293 L CH4/gDQO; mientras que, el bioproceso HE tuvo una producción máxima de 9,5 L/día de biogás y un rendimiento de 0.16 L CH4/gDQO. Los estudios moleculares de qPCR mostraron una disminución de la actividad de toda la comunidad microbiana presente en el biorreactor HE con valores para las bacterias de 8. 70x105 a 1.62 x105 copias/mL y arqueas de 3.06x104 a 1.53x104 copias/mL; mientras que en el biorreactor HA se observó una importante disminución de bacterias con valores de 1.22x107 a 2.36x106 copias/mL y valores constantes de las poblaciones arqueanas de 2.75 x105 a 1.88x105 copias/mL. Al estudiar la presencia (ADN) de las comunidades microbianas no se obtuvieron correlaciones entre las variables, que explicaran el desempeño de los bioprocesos. Los resultados de secuenciación masiva evidenciaron distintas dinámicas de poblaciones en los dos biorreactores, observándose una disminución en las asociaciones sintróficas en el sistema HE y el aumento de dichas asociaciones en el sistema HA. Adicionalmente, se observó que el reactor HA presentó menor diversidad microbiana, una mayor redundancia metabólica y uniformidad en sus grupos dominantes en comparación con el biorreactor HE donde fue mayor la diversidad de la comunidad microbiana. Los análisis estadísticos de correlaciones sugierieron que el biorreactor HE tuvo un bajo desempeño debido a que la actividad de la comunidad microbiana disminuyó a causa de la acumulación de ácido propiónico y azúcares totales ocasionada por la desgranulación del lodo, que conllevó a bajos rendimiento y producción de biogás. Mientras que en el biorreactor HA la produción de metano vía propionato fue favorecida por la actividad de poblaciones sintroficas. Este trabajo, a través del estudio molecular de la actividad microbiana, permitió observar cambios en la dinámica poblacional de bacterias y arqueas que se correlacionaron estadísticamente a factores fisicoquímicos e ingenieríles.
dc.description.tableofcontentsINDICE ABREVIATURAS ................................................................ .......................................................... i INDICE DE TABLAS .... ............................................................................................................... iii INDICE DE FIGURAS ................................. ................................................................................ iv RESUMEN .................................................................. ................................................................ 1 ABSTRACT. ................................................................ ................................................................ 2 INTRODUCCIÓN ................................................................ ........................................................ 3 JUSTIFICACIÓN ................................................................. ........................................................ 5 HIPÓTESIS ................................................................................................................................. 6 OBJETIVOS ................................................................................................................................ 6 Objetivo General. ...................................................................................................................... 6 Objetivos Particulares ............................................................................................................... 6 1 ANTECEDENTES .................................................................................................................... 7 1. Ecología microbiana ............................................................................................................. 7 2. Características de una comunidad microbiana en un bioproceso ......................................... 8 3. Comunidades microbianas anaerobias presentes en el tratamiento de residuos de la industria tequilera ................................................................................................................... 1 O 3.1. Interacciones sintróficas y de competencia en sistemas de digestión anaerobia ......... 13 3.2. Problemática del análisis microbiano en el tratamiento anaerobio de residuos tequileros .......................................................................................................................................... 16 4. Dinámica poblacional en la digestión anaerobia ................................................................. 19 4.1. Cambios en la estructura de las poblaciones arqueanas en ecosistemas estables ..... 19 4.2. Cambios en los elementos ingenieriles que modifican la estructura de las poblaciones arqueanas ................................................................ .......................................................... 21 4.3. Cambios en los elementos fisicoquímicos que modifican la estructura de las poblaciones arqueanas ...................................................................................................... 21 4.4. Dinámica poblacional de los órdenes de arqueas metanógenas presentes y activas .. 23 5. Herramientas para el estudio de la ecología microbiana ..................................................... 24 5.1. Técnicas de biología molecular ................................. .................................................. 24 5.2. Desventajas del uso de técnicas moleculares ............................................................. 27 2 MATERIALES Y MÉTODOS ................................ .................................................................. 29 1. Condiciones de operación de los reactores ........................................................................ 29 2. Medición de variables fisicoquímicas ................................ .................................................. 31 3. Extracción de ADN ............................................................................................................. 31 4. Extracción de ARN ............................................................................................................. 32 4.1. Medios de conservación .............................................................................................. 32 4.2. Metodologías para la extracción de ARN .................................................................... 33 4.3. Rendimiento de extracción de ARN ............................................................................. 35 4.4. Integridad del ARN extraído ........................................................................................ 35 4.5. Limpieza del ARN extraído .......................................................................................... 35 5. Generación de ADN copia (ADNc) a partir del ARN extraído .............................................. 36 6. PCR cuantitativa (qPCR) .................................................................................................... 36 7. Secuenciación masiva ........................................................................................................ 38 8. Análisis estadístico de los datos ......................................................................................... 38 8.1. Correlación de las variables en cada bioproceso ........................................................ 39 8.2. Comparación de los bioprocesos con diferente hidrolizado de bagazo tequilero ......... 39 8.3. Elaboración de los escenarios bioquímicos en cada bioproceso ................................. 40 3 RESULTADOS Y DISCUSIONES .......................................................................................... 41 3.1. Caracterización de los hidrolizados ............................................................................. 41 3.2. Desempeño de los biorreactores ................................................................................. 41 3.3. Estudio de la comunidad microbiana ........................................................................... 43 3.4. Escenarios ecológicos ................................................................................................. 67 4 CONCLUSIONES Y PERSPECTIVAS ................................................................................... 79 REFERENCIAS ........................................................................................................................ 81 ANEXOS ................................................................................................................................... 84
dc.formatapplication/PDF
dc.language.isospa
dc.publisherBiblioteca Digital wdg.biblio
dc.publisherUniversidad de Guadalajara
dc.rights.urihttps://wdg.biblio.udg.mx/politicasdepublicacion.php
dc.titleCaracterización molecular de poblaciones arqueanas metanogénicas presentes y activas en el tratamiento anaerobio de hidrolizados de bagazo tequilero e interpretación del bioproceso mediante métodos estadísticos multivariados
dc.typeTesis de Maestria
dc.rights.holderUniversidad de Guadalajara
dc.rights.holderPintado González, Maricarmen
dc.coverageGuadalajara, Jalisco
dc.type.conacytmasterThesis-
dc.degree.nameMAESTRIA EN CIENCIAS EN PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS-
dc.degree.departmentCUCEI-
dc.degree.grantorUniversidad de Guadalajara-
dc.degree.creatorMAESTRA EN CIENCIAS EN PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS-
Aparece en las colecciones:CUCEI

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